化学发光和酶免结果不符,为什么?怎么办?



在临床免疫工作中,常常涉及到一些乙肝五项两种方法分析结果不完全一致的情况,以核心抗体多见,如乙肝ELISA试验核心抗体为阴性,但是电化学发光法分析为阳性,而这样的结果又多发生在老年人。但是最近,一例新生儿科的小患者,在观察了他的检验结果后,让我们不知所措。

案例经过

2017年12月12日,这名小患者中午抽血进行传染病项目的筛查,由于错过当天的检验时间(每天上午八点半收集好标本开始检测),将血离心后放入4℃冰箱保存,于次日检测后发出结果:

这名小患者是一位早产儿和极低出生体重儿,情况比较严重,孩子从出生到抽血当天未接种乙肝疫苗,而且小患者的母亲乙肝五项ELISA法结果是全部阴性。主管医生对结果表示怀疑,于12月14日中午重新抽血开出了乙型肝炎相关检查的医嘱,结果如下:

化学发光和酶免结果不符,为什么?怎么办?

化学发光和酶免结果不符,为什么?怎么办?

化学发光和酶免结果不符,为什么?怎么办?

可以看出,乙肝五项电化学发光法检测前后是一致的(结果为三个抗体阳性),只是同一个标本乙肝五项ECLIA测定与ELISA试验(仅表面抗体阳性)并不一致,出于谨慎医生还开出了HBV-DAN检查的医嘱,结果显示正常。我们采用酶联免疫吸附法,其中表面抗体采用双抗原夹心法;HBeAb为竞争法,血样中的抗-HBe与辣根过氧化物酶标记的抗-HBe竞争结合包被在反应板上的HBeAg;核心抗体同e抗体检测方法为竞争法。而乙肝五项电化学发光法,其中表面抗体为双抗原夹心法,生物素化的HBsAg、样本中的HBsAb和钌复合物标记的HBsAg形成夹心复合物;e抗体为竞争法,标本中的HBeAb与生物素化和钌复合物标记的HBeAb竞争结合试剂中的HBeAg;核心抗体检测原理同e抗体。

出现两种检查结果不一致的情况,医生也不知道该如何解释。是什么情况让一个没有接种过疫苗的新生儿出现表面抗体甚至是乙肝相关的三个抗体阳性呢,经过查阅资料,得出在免疫测定中,影响结果的干扰因素较多如:1.异嗜性抗体;2.人抗动物抗体;3.自身抗体;4.类风湿因子;5.高浓度非特异性免疫球蛋白等可造成结果的假阳性。

与临床医师沟通,由于患儿系早产高危儿,免疫力低下,生活能力低下,医生于12月11日也就是第一次采血的前一天给患儿输入了免疫球蛋白来增加其抵抗力,这就可能是造成这种情况的主要原因。查阅说明书,电化学发光法乙型肝炎病毒表面抗原测定试剂,其中干扰因素一条解释:浓度高达3765mg/dL的免疫球蛋白IgM、浓度高达3250mg/dL的免疫球蛋白IgA和浓度高达3817mg/dL的免疫球蛋白IgG不对检测的敏感性和特异性造成影响。但该法乙型肝炎相关的其余四项检测的说明书在干扰因素的解释中均未提及免疫球蛋白对检测的影响,不能说免疫球蛋白对它们的检测没有影响。

患儿于采血的前一天输入了免疫球蛋白,其中静脉注射的免疫球蛋白多数为IgG,而乙型肝炎病毒表面抗体试剂针对的也是IgG类型的抗体,感染早期e抗体和核心抗体是IgM,感染持续一段时间后主要是IgG类型。那么如果输入的免疫球蛋白与检测项目存在相似的靶位,则会存在干扰的作用,造成结果的假阳性。ELISA方法仅表面抗体检测受到影响,e抗体和核心抗体则没有影响,可能与方法学及试剂检测的相关靶位不同有关,另外ELISA试验核心抗体血清需要稀释30倍也是一个因素。

分析与心得

今后遇到类似情况,我们会积极与临床医师沟通,采用不同方法检查,并且定期追踪检测,才能得出反映患者体内的三个抗体的真实水平。




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